流式細胞儀
產(chǎn)品名稱(chēng)
流式細胞儀
管理類(lèi)別
第二類(lèi)
型號規格
ZS-AD6、ZS-AE7S
結構及組成/主要組成成分
流式細胞儀由機械結構、光學(xué)系統、流體系統、電子學(xué)系統、軟件系統組成
適用范圍/預期用途
適用于人淋巴細胞亞群的鑒定和計數
（一）流式細胞儀的主要用途：
1、分析細胞表面標志。細胞表面的功能很復雜，是近年來(lái)分子細胞生物學(xué)研究的新域，細胞表面標志與免疫、癌變等都有著(zhù)十分密切的關(guān)系。流式細胞儀的發(fā)明可以很好進(jìn)行細胞表面標志的分析，起到非常重要的作用。
2、分析細胞內抗原物質(zhì)�？乖悄艽碳C體產(chǎn)生抗體或致敏淋巴細胞，并與這些產(chǎn)物發(fā)生特異性反應的物質(zhì)。通過(guò)流式細胞儀對于細胞內的抗原物質(zhì)進(jìn)行分析可以很好地了解機體的免疫功能等。
3、分析細胞受體。細胞受體主要是同脂溶性的小信號分子相作用，流式細胞儀通過(guò)對細胞受體的分析可以幫助調節更多的基因表達。
4、分析腫瘤細胞的DNA、RNA含量。流式細胞儀通過(guò)對腫瘤細胞的DNA、RNA分析，可以判斷出病變程度，對于診斷和治療是非常有利的。
5、分析免疫細胞的功能。免疫細胞俗稱(chēng)白細胞，包括淋巴細胞、吞噬細胞等，流式細胞儀通過(guò)對于人體內的免疫細胞進(jìn)行功能的分析，可以更好的判斷出各類(lèi)細胞的功能，這對于幫助人體建立良好的免疫系統非常有幫助。
總結：流式細胞儀除了以上的主要用途之外，還被用于進(jìn)行液體的活檢，包括ddPCR、NGS、CTC、還有ctDNA等。
（二）流式細胞儀的使用及注意事項
流式細胞儀在使用，甚至在使用過(guò)程中都要精心進(jìn)行調試，以保證工作的可靠性和性。調試的項目主要是激光強度、液流速度和測量區的光路等。
(1) 激光強度調節：除調整反射鏡的角度以調整到所需波長(cháng)的激光出光外，還要結合顯示屏上的光譜曲線(xiàn)使激光的強度輸出為大。
(2) 液流速度調節：可通過(guò)操作臺數字顯示監督，調節 氣體壓力大小以獲得穩定的液流速度。
(3) 測量區光路調節：這是調試工作的關(guān)鍵。需要保證在測量區的液流、激光束、90散射測量光電系統垂直正交，而且交點(diǎn)較小。一般可在用標準熒光微球等校準中完成。
流式細胞術(shù)中所測得的量是相對值，因此需要在使用或使用中對系統進(jìn)行校準或標定，這樣才能通過(guò)相對測量獲得對的意義。因而FCM中的校準具有雙重功能：儀器的準直調整和定量標度。標準樣品應該穩定，有形成份形狀應是大小比較一致球形，樣品分散性能良好，且經(jīng)濟、容易獲得。常用標準熒光微球作為非生物學(xué)標準樣品，雞血紅細胞做為生物學(xué)標準樣品。
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微球用樹(shù)脂材料制作，或標有熒光素，或不標記熒光素。所用的雞血紅細胞標準樣品制作過(guò)程昭下：取3.8%枸櫞酸或肝素抗凝的雞血(抗凝劑：雞血=1：4)，經(jīng)PBS清洗3次，再用5～10ml的1.0%戊二醛與清洗后的雞紅細胞混合，室溫下振蕩醛化24h，后經(jīng)PBS再清洗，貯4℃冰箱中備用。需要指出的是因為未經(jīng)熒光染色，所測光信號為雞血紅蛋白的自發(fā)熒光。
（三）流式細胞儀的操作和使用
(1) 打開(kāi)電源，對系統進(jìn)行預熱；
(2) 打開(kāi)氣體閾，調節 壓力，獲得適宜的液流速度；開(kāi)啟光源冷卻系統；
(3) 在樣品管中加入去離子水，沖洗液流的噴嘴系統；
(4) 利用校準標準樣品，調整儀器，使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調定的基礎上，0和90散射的熒光強度強，并要求變異系數為��；
(5) 選定流速、測量細胞數、測量參數等，在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品;同時(shí)選擇計算機屏上數據的顯示方式，從而能直觀(guān)掌握測量進(jìn)程；
(6) 樣品測量完畢后，再用去離子水沖洗液流系統；
(7) 因為實(shí)驗數據已存入計算機硬盤(pán)(有的機器還備有光盤(pán)系統，存貯量更大)，因此可關(guān)閉氣體、測量裝置，而單獨使用計算機進(jìn)行數據處理；
(8) 將所需結果打印出來(lái)。
1.4.3 操作和使用中的注意事項
(1) 光電倍增管要求穩定的工作條件，暴露的較強的光線(xiàn)下以后，需要較長(cháng)時(shí)間的“暗適應”以消除或降低部分暗電流本底才能工作；另外還要注意磁屏蔽；
(2) 光源不得在短時(shí)間內(一般要1h左右)關(guān)上又打開(kāi);使用光源必須預熱并注意冷卻系統工作是否正常；
(3) 液流系統必需隨時(shí)保持液流暢通，避免氣泡栓塞，所使用的鞘流液使用要經(jīng)過(guò)過(guò)濾、消毒；注意根據測量對象的變換選用合適的濾片系統、放大器的類(lèi)型等；
(4) 特別強度每次測量都需要對照組
更新時(shí)間：2024/10/14 13:32:24
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標簽：流式 流式細胞儀 細胞儀
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