實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀Real-Time PCR Instrument
產(chǎn)品名稱(chēng)
實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀Real-Time PCR Instrument
管理類(lèi)別
第三類(lèi)
型號規格
QuantStudioTM 1,QuantStudioTM 3,QuantStudioTM 5
結構及組成/主要組成成分
該產(chǎn)品由LED、熱循環(huán)模塊、加熱蓋、電動(dòng)抽屜（QuantStudioTM 3,QuantStudioTM 5）或手動(dòng)抽屜（QuantStudioTM 1）、激發(fā)和發(fā)射濾光輪、光學(xué)盒、LCD顯示器和觸摸屏、集成計算機、電源和軟件（桌面軟件版本：1.6，QuantStudioTM 3,QuantStudioTM 5儀器固件版本：1.4， QuantStudioTM 1儀器固件版本1.1）組成。
適用范圍/預期用途
該產(chǎn)品基于熒光標記的聚合酶鏈式反應（PCR）原理，與配套的檢測試劑共同使用，在臨床上用于對來(lái)源于人體樣本中的靶核酸進(jìn)行定性或定量檢測，包括人類(lèi)基因檢測項目和病原體核酸檢測項目。
（一） 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀Real-Time PCR Instrument
實(shí)時(shí)熒光定量pcr儀，由熒光定量系統和計算機組成，用來(lái)監測循環(huán)過(guò)程的熒光。與實(shí)時(shí)設備相連的計算機收集熒光數據。數據通過(guò)開(kāi)發(fā)的實(shí)時(shí)分析軟件以圖表的形式顯示。原始數據被繪制成熒光強度相對于循環(huán)數的圖表。原始數據收集后可以開(kāi)始分析。實(shí)時(shí)設備的軟件能使收集到的數據進(jìn)行正�；幚韥�(lái)彌補背景熒光的差異。正�；罂梢栽O定域值水平，這就是分析熒光數據的水平。
（二） 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀Real-Time PCR Instrument設備簡(jiǎn)介
實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀+實(shí)時(shí)熒光定量試劑+通用電腦+自動(dòng)分析軟件，構成PCR-DNA/RNA實(shí)時(shí)熒光定量檢測系統。
優(yōu)勢編輯 播報
樣品到達域值水平所經(jīng)歷的循環(huán)數稱(chēng)為Ct值（限制點(diǎn)的循環(huán)數）。域值應設定在使指數期的擴增效率為大，這樣可以獲得準確，可重復性的數據。如果同時(shí)擴增的還有標有相應濃度的標準品，線(xiàn)性回歸分析將產(chǎn)生一條標準曲線(xiàn)，可以用來(lái)計算未知樣品的濃度。
（三） 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀Real-Time PCR Instrument技術(shù)原理
所謂real-time Q-PCR技術(shù)，是指在PCR反應體系中加入熒光基因，利用熒光信號累積實(shí)時(shí)監測整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標準曲線(xiàn)對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。在 real-time 技術(shù)的發(fā)展過(guò)程中，兩個(gè)重要的發(fā)現起著(zhù)關(guān)鍵的作用：（1）在90年代早期，TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的發(fā)現，它能降解特異性熒光記探針，因此使得間接的檢測PCR產(chǎn)物成為可能。（2）此后熒光雙標記探針的運用使在一密閉的反應管中能實(shí)時(shí)地監測反應全過(guò)程。這兩個(gè)發(fā)現的結合以及相應的儀器和試劑的商品化發(fā)展導致real-time Q-PCR方法在研究工作中的運用。
PCR反應過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數是呈指數方式增加的，隨著(zhù)反應循環(huán)數的增加，終PCR反應不再以指數方式生成模板，從而進(jìn)入平臺期。在傳統的PCR 中，常用凝膠電泳分離并用熒光染色來(lái)檢測PCR反應的終擴增產(chǎn)物，因此用此終點(diǎn)法對PCR產(chǎn)物定量存在不可靠之處。在real-time Q-PCR中，對整個(gè)PCR反應擴增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的監測和連續地分析擴增相關(guān)的熒光信號，隨著(zhù)反應時(shí)間的進(jìn)行，監測到的熒光信號的變化可以繪制成一條曲 線(xiàn)。在PCR反應早期，產(chǎn)生熒光的水平不能與背景明顯地區別，而后熒光的產(chǎn)生進(jìn)入指數期、線(xiàn)性期和終的平臺期，因此可以在PCR反應處于指數期的某一點(diǎn) 上來(lái)檢測PCR產(chǎn)物的量，并且由此來(lái)推斷模板初的含量。為了便于對所檢測樣本進(jìn)行比較，在real-time Q-PCR反應的指數期，先需設定一定熒光信號的域值，一般這個(gè)域值（threshold）是以PCR反應的15個(gè)循環(huán)的熒光信號作為熒光本底信號 （baseline），熒光域值的缺省設置是3～15個(gè)循環(huán)的熒光信號的標準偏差的10倍。如果檢測到熒光信號超過(guò)域值被認為是真正的信號，它可用于定義 樣本的域值循環(huán)數（Ct）。Ct值的含義是：每個(gè)反應管內的熒光信號達到設定的域值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數。研究表明，每個(gè)模板的Ct值與該模板的起始拷貝數的 對數存在線(xiàn)性關(guān)系，起始拷貝數越多，Ct值越小。利用已知起始拷貝數的標準品可作出標準曲線(xiàn)，因此只要獲得未知樣品的Ct值，即可從標準曲線(xiàn)上計算出該樣 品的起始拷貝數。
更新時(shí)間：2024/10/14 13:32:24
經(jīng)營(yíng)許可證號：滬寶食藥監械經(jīng)營(yíng)許20220040號
標簽：實(shí)時(shí)熒光 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀 定量PCR儀
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