流式細胞儀
產(chǎn)品名稱(chēng)
流式細胞儀
管理類(lèi)別
第二類(lèi)
型號規格
NovoCyte D1040、NovoCyte D1041、NovoCyte D2040R、NovoCyte D2041R、NovoCyte D2060R、NovoCyte D2061R、NovoCyte D2110V、NovoCyte D2111V、NovoCyte D3080、NovoCyte D3081、NovoCyte D3130、NovoCyte D3131、NovoCyte D3000、NovoCyte D3001
結構及組成/主要組成成分
產(chǎn)品由主機、電源適配器、儲液臺組成。
適用范圍/預期用途
產(chǎn)品適用于臨床使用中對單細胞或其他非生物顆粒膜表面以及內部的生物化學(xué)及生物物理特性成分進(jìn)行定量分析用。
(一)流式細胞儀的主要用途:
1、分析細胞表面標志。細胞表面的功能很復雜,是近年來(lái)分子細胞生物學(xué)研究的新域,細胞表面標志與免疫、癌變等都有著(zhù)十分密切的關(guān)系。流式細胞儀的發(fā)明可以很好進(jìn)行細胞表面標志的分析,起到非常重要的作用。
2、分析細胞內抗原物質(zhì)?乖悄艽碳C體產(chǎn)生抗體或致敏淋巴細胞,并與這些產(chǎn)物發(fā)生特異性反應的物質(zhì)。通過(guò)流式細胞儀對于細胞內的抗原物質(zhì)進(jìn)行分析可以很好地了解機體的免疫功能等。
3、分析細胞受體。細胞受體主要是同脂溶性的小信號分子相作用,流式細胞儀通過(guò)對細胞受體的分析可以幫助調節更多的基因表達。
4、分析腫瘤細胞的DNA、RNA含量。流式細胞儀通過(guò)對腫瘤細胞的DNA、RNA分析,可以判斷出病變程度,對于診斷和治療是非常有利的。
5、分析免疫細胞的功能。免疫細胞俗稱(chēng)白細胞,包括淋巴細胞、吞噬細胞等,流式細胞儀通過(guò)對于人體內的免疫細胞進(jìn)行功能的分析,可以更好的判斷出各類(lèi)細胞的功能,這對于幫助人體建立良好的免疫系統非常有幫助。
總結:流式細胞儀除了以上的主要用途之外,還被用于進(jìn)行液體的活檢,包括ddPCR、NGS、CTC、還有ctDNA等。
(二)流式細胞儀的使用及注意事項
流式細胞儀在使用,甚至在使用過(guò)程中都要精心進(jìn)行調試,以保證工作的可靠性和性。調試的項目主要是激光強度、液流速度和測量區的光路等。
(1) 激光強度調節:除調整反射鏡的角度以調整到所需波長(cháng)的激光出光外,還要結合顯示屏上的光譜曲線(xiàn)使激光的強度輸出為大。
(2) 液流速度調節:可通過(guò)操作臺數字顯示監督,調節 氣體壓力大小以獲得穩定的液流速度。
(3) 測量區光路調節:這是調試工作的關(guān)鍵。需要保證在測量區的液流、激光束、90散射測量光電系統垂直正交,而且交點(diǎn)較小。一般可在用標準熒光微球等校準中完成。
流式細胞術(shù)中所測得的量是相對值,因此需要在使用或使用中對系統進(jìn)行校準或標定,這樣才能通過(guò)相對測量獲得對的意義。因而FCM中的校準具有雙重功能:儀器的準直調整和定量標度。標準樣品應該穩定,有形成份形狀應是大小比較一致球形,樣品分散性能良好,且經(jīng)濟、容易獲得。常用標準熒光微球作為非生物學(xué)標準樣品,雞血紅細胞做為生物學(xué)標準樣品。
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微球用樹(shù)脂材料制作,或標有熒光素,或不標記熒光素。所用的雞血紅細胞標準樣品制作過(guò)程昭下:取3.8%枸櫞酸或肝素抗凝的雞血(抗凝劑:雞血=1:4),經(jīng)PBS清洗3次,再用5~10ml的1.0%戊二醛與清洗后的雞紅細胞混合,室溫下振蕩醛化24h,后經(jīng)PBS再清洗,貯4℃冰箱中備用。需要指出的是因為未經(jīng)熒光染色,所測光信號為雞血紅蛋白的自發(fā)熒光。
(三)流式細胞儀的操作和使用
(1) 打開(kāi)電源,對系統進(jìn)行預熱;
(2) 打開(kāi)氣體閾,調節 壓力,獲得適宜的液流速度;開(kāi)啟光源冷卻系統;
(3) 在樣品管中加入去離子水,沖洗液流的噴嘴系統;
(4) 利用校準標準樣品,調整儀器,使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調定的基礎上,0和90散射的熒光強度強,并要求變異系數為;
(5) 選定流速、測量細胞數、測量參數等,在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品;同時(shí)選擇計算機屏上數據的顯示方式,從而能直觀(guān)掌握測量進(jìn)程;
(6) 樣品測量完畢后,再用去離子水沖洗液流系統;
(7) 因為實(shí)驗數據已存入計算機硬盤(pán)(有的機器還備有光盤(pán)系統,存貯量更大),因此可關(guān)閉氣體、測量裝置,而單獨使用計算機進(jìn)行數據處理;
(8) 將所需結果打印出來(lái)。
1.4.3 操作和使用中的注意事項
(1) 光電倍增管要求穩定的工作條件,暴露的較強的光線(xiàn)下以后,需要較長(cháng)時(shí)間的“暗適應”以消除或降低部分暗電流本底才能工作;另外還要注意磁屏蔽;
(2) 光源不得在短時(shí)間內(一般要1h左右)關(guān)上又打開(kāi);使用光源必須預熱并注意冷卻系統工作是否正常;
(3) 液流系統必需隨時(shí)保持液流暢通,避免氣泡栓塞,所使用的鞘流液使用要經(jīng)過(guò)過(guò)濾、消毒;注意根據測量對象的變換選用合適的濾片系統、放大器的類(lèi)型等;
(4) 特別強度每次測量都需要對照組
更新時(shí)間:2024/10/14 13:32:24
經(jīng)營(yíng)許可證號:滬寶食藥監械經(jīng)營(yíng)許20220040號
標簽:流式 流式細胞儀 細胞儀